含量試劑盒中亞硫酸鈉能夠還原Fe3+為Fe2+,F(xiàn)e2+進一步與2,2’-聯(lián)吡啶顯色,產(chǎn)物在520nm處具有特征吸收峰,通過吸光值的變化即可定量檢測鐵的含量。
鐵是人體需要的微量元素之一,它是血紅蛋白、肌紅蛋白、細(xì)胞色素及其他酶系統(tǒng)的主要成分,幫助氧的運輸,促進脂肪氧化.缺乏鐵元素容易造成貧血、代謝紛亂,并影響機體的免疫功能.亞硫酸鈉還原Fe3+生成Fe2+,F(xiàn)e2+進一步與2,2’-聯(lián)吡啶顯色,在520nm處有吸收峰,測定該波長吸光度即可計算鐵含量。
組織鐵含量計算:
1.按組織質(zhì)量計算:
組織鐵含量(μg/g質(zhì)量)=(C標(biāo)準(zhǔn)液×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn))×V提取×55.845÷W=6.98×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W
2.按組織蛋白濃度計算:
組織鐵含量(μg/mgprot)=(C標(biāo)準(zhǔn)液×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn))×V提取×55.845÷(Cpr×V提取)=6.98×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷Cpr
C標(biāo)準(zhǔn)液:0.125μmol/mLFe3+標(biāo)準(zhǔn)液;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;V提?。禾崛∫后w積,1mL;55.845:Fe的相對分子質(zhì)量,55.845μg/μmol。
注意事項:
1、當(dāng)ΔA大于0.6時,建議將樣本用提取液稀釋后進行測定。
2、試劑一溶解變黑后則不能使用;試劑二有毒性,做好防護措施。